医学真菌荧光染色液临床标本真菌检查方法诊断方法对比
直接显微镜检查:
将所取标本直接置于玻片上,用染色或加10%KOH溶液,在光镜下检查。先在低倍镜下检查有无菌丝和孢子,然后用高倍镜观察菌丝和孢子的形态、特征、位置、大小和排列等,大致区分其种属。
评价:直接涂片镜检是一种常用、简便而迅速的真菌检测方法。但该法阳性率不高,经验不足会造成漏诊;适用范围受限制,很多真菌不能通过直接镜检来确定,还需要进一步培养鉴定。
分离培养方法:
取毛发、皮屑、甲屑等标本,用70%乙醇消毒,接种沙保氏琼脂斜面培养基,25℃培养7~14天,根据菌落形态及颜色、并挑取菌落镜检菌丝及孢子的特征进行鉴定。
评价:真菌生长缓慢,培养常需要数天甚至数周才有结果,敏感性低。培养方法是通过表型特征来鉴定真菌,而表型特征容易受到外界因素如温度变化或药物治疗的影响。有些标本采集困难。
血清学方法:
目前对真菌感染血清抗原检查主要有:
分子生物学方法:
分子生物学方法包括:限制性片断长度多态性分析(RFLP)、随机扩增多态性分析(RAPD)、脉冲电泳分析(PFGE)、核酸杂交法、rDNA序列测定、蛋白编码基因测序、任意引物聚合酶链反应(AP-PCR)。
评价:分子生物学方法运用聚合酶链反应(PCR)等特殊技术,具有敏感度高、特异性强等特点。但需要特殊设备,检测成本高,操作难度大,要求严格,真正用于临床还需进一步标准化。
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